REPRODUCCIÓN

Con fines de entender las bases genético/fisiológicas de la capacidad reproductiva del camarón, hemos investigado en el pasado las respuestas fenotípicas y genéticas para diferentes caracteres reproductivos. Nuestros resultados han indicado que existen tres características fenotípicas principales que, una vez que los reproductores son puestos a desovar, son indicadoras de una alta capacidad reproductiva: el número de desoves, el contenido de vitelina en los huevos desovados, y los días para que ocurra el primer desove después de la ablación.Todas las características antes mencionadas presentaron suficiente variabilidad genética-aditiva en la población evaluada, lo que permitiría el mejoramiento de la capacidad reproductiva por medio de la selección genética.Así mismo, hemos encontrado que la concentración de vitelogenina en hemolinfa antes de la ablación, presenta una alta correlación fenotípica y genética con el tamaño de los ovocitos de las hembras (Fig. 1), y hemos propuesto el utilizar esta característica para pre-evaluar a las hembras antes de someterlas a ablación y maduración en laboratorios, así como el utilizar este caracter para la selección genética de la capacidad reproductiva del camarón, ya que permitiría realizar la selección paralela con otros caracteres productivos, como sería el crecimiento.

Mientras que el conocimiento logrado a la fecha ha sido importante y directamente aplicado a la industria, pocos genes asociados directamente con la reproducción, así como interacciones entre los mismos, son conocidos a la fecha. Esto es, hasta recientemente el estudio de genes efectores involucrados en la reproducción ha estado restringido a un solo gen debido a dificultades prácticas y tecnológicas de incluir a más de uno. Sin embargo, nuevas tecnologías como la de microarreglos permitirán obtener una visión integrada de los procesos reproductivos y de esta forma identificar no solamente genes, sino mecanismos y metodologías específicas que permitan valorar tanto fenotípicamente (indicadores predictivos) como genotípicamente (genes candidato para la selección asistida por marcadores moleculares) a los reproductores. La participación específica de determinados genes en procesos reproductivos, como aquellos involucrados en establecer el inicio de la gametogénesis, la vitelogénesis primaria y secundaria por ejemplo, puede estudiarse de manera más amplia también con el uso de microarreglos, que permiten la identificación simultánea de genes expresados diferencialmente en organismos con condiciones reproductivas diferentes, como serían por ejemplo diferentes estadios de madurez gonádica.

En este proyecto buscamos por lo tanto identificar genes clave interactuando en el desarrollo gonádico del camarón blanco a través de estudios de genómica funcional. Para lograr esto, en primera instancia obtendremos secuencias parciales de genes expresados (ESTs) en dos tejidos clave en la reproducción: órgano X del tallo ocular y ovario. Posteriormente evaluaremos la expresión diferencial de estos genes en diferentes condiciones de madurez gonádica utilizando un microarreglo producido con genes expresados en múltiples tejidos de Litopenaeus vannamei.

Objetivos:

Producir y validar un microarreglo ‘ReproVANNAMEI’ con un mínimo de 800 ESTs derivados de cDNA de genes expresados en ovario, órgano X-tallo ocular y hepatopáncreas de camarón.

1. Aislar y secuenciar genes expresados en ovario y en el órgano X-tallo ocular de camarón
2. dentificar genes a partir de la secuenciación de 900 clonas ya existentes y obtenidas previamente por medio de genotecas normalizadas de cDNA derivadas de ovario
3. Evaluar en un microarreglo que incluirá los genes identificados en la etapa I de este proyecto y otros derivados del proyecto global, los perfiles de expresión para genes asociados al desarrollo gonádico, validando dicha expresión por cuantificación de la expresión génica (qPCR de tiempo real).

Productos:

• Genotecas sustractivas (SSH) recíprocas (inmaduro vs. maduro) de ovario y órgano X-tallo ocular de Litopenaeus vannamei.
• Base de datos con los genes identificados en SSH y clonas existentes derivadas de genotecas normalizadas de ovario.
• Perfiles de expresión tejido-específicos de genes reproductivos
• Un microarreglo validado de L. vannamei conteniendo genes diferencialmente expresados en tejidos importantes para la reproducción.

Participantes:

Instituciones Participantes: